mTOR inhibitors a potential predisposing factor for chronic hepatitis E: Results from the prospective collaborative CHES study (Chronic Hepatitis EScreening in patients with immune impairment and increased transaminases levels) / Los inhibidores de mTOR como potencial factor predisponente para la hepatitis crónica E: resultados del estudio prospectivo colaborativo CHES (Chronic Hepatitis E Screening in patients with immune impairment and increased transaminases levels)

Background: Chronic hepatitis E virus (HEV) in persons with immune impairment has a progressive course leading to a rapid progression to liver cirrhosis. However, prospective data on chronic HEV is scarce. The aim of this study was to determine the prevalence and risk factors for chronic HEV infection in subjects with immune dysfunction and elevated liver enzymes. Patients and methods: CHES is a multicenter prospective study that included adults with elevated transaminases values for at least 6 months and any of these conditions: transplant recipients, HIV infection, haemodialysis, liver cirrhosis, and immunosuppressant therapy. Anti-HEV IgG/IgM (Wantai ELISA) and HEV-RNA by an automated highly sensitive assay (Roche diagnostics) were performed in all subjects. In addition, all participants answered an epidemiological survey. Results: Three hundred and eighty-one patients were included: 131 transplant recipients, 115 cirrhosis, 51 HIV-infected subjects, 87 on immunosuppressants, 4 hemodialysis. Overall, 210 subjects were on immunosuppressants. Anti-HEV IgG was found in 94 (25.6%) subjects with similar rates regardless of the cause for immune impairment. HEV-RNA was positive in 6 (1.6%), all of them transplant recipients, yielding a rate of chronic HEV of 5.8% among solid-organ recipients. In the transplant population, only therapy with mTOR inhibitors was independently associated with risk of chronic HEV, whereas also ALT values impacted in the general model. Conclusions: Despite previous abnormal transaminases values, chronic HEV was only observed among solid-organ recipients. In this population, the rate of chronic HEV was 5.8% and only therapy with mTOR inhibitors was independently associated with chronic hepatitis E. (AU)

Introducción: La infección crónica por el virus de la hepatitis E (VHE) en personas con disfunción inmunitaria tiene un curso progresivo conllevando una rápida progresión a cirrosis hepática. Sin embargo, los datos prospectivos a este respecto son escasos. El objetivo de este estudio fue determinar la prevalencia y factores de riesgo para la infección crónica VHE en sujetos con disfunción inmunitaria y elevación de enzimas hepáticos. Pacientes y métodos: CHES es un estudio prospectivo multicéntrico que incluyó adultos con transaminasas elevadas durante al menos 6 meses y alguno de estos factores: receptores de trasplante, infección por VIH, hemodiálisis, cirrosis hepática o tratamiento inmunosupresor. En todos los sujetos se realizaron IgG/IgM anti-VHE (Wantai Elisa) y ARN-VHE por una técnica super sensible (Roche Diagnostics). Además, todos los participantes contestaron una encuesta epidemiológica. Resultados: 381 pacientes fueron incluidos: 131 trasplantados, 115 cirróticos, 51 infectados por VIH, 87 bajo inmunosupresores, 4 hemodiálisis. En total, 210 sujetos recibían inmunosupresores. La IgG anti-VHE fue positiva en 94 (25,6%) sujetos, con tasas similares en todas la causas de disfunción inmunitaria. El ARN-VHE fue positivo en 6 (1,6%) pacientes, todos ellos trasplantados, siendo la tasa de infección crónica VHE en receptores de órgano sólido del 5,8%. En la población de trasplantados, solo el tratamiento con inhibidores de mTOR se asoció de forma independiente a la hepatitis crónica VHE, mientras que los niveles de ALT impactaron en el modelo general. Conclusiones: A pesar de los niveles anormales de transaminasas, solo se objetivó hepatitis crónica VHE en trasplantados de órgano sólido. En esta población, la tasa de hepatitis crónica VHE fue del 5,8% y solo el tratamiento con inhibidores de mTOR se asoció de forma independiente a la hepatitis crónica E. (AU)

mTOR inhibitors a potential predisposing factor for chronic hepatitis E: Results from the prospective collaborative CHES study (Chronic Hepatitis EScreening in patients with immune impairment and increased transaminases levels).

BACKGROUND: Chronic hepatitis E virus (HEV) in persons with immune impairment has a progressive course leading to a rapid progression to liver cirrhosis. However, prospective data on chronic HEV is scarce. The aim of this study was to determine the prevalence and risk factors for chronic HEV infection in subjects with immune dysfunction and elevated liver enzymes. PATIENTS AND METHODS: CHES is a multicenter prospective study that included adults with elevated transaminases values for at least 6 months and any of these conditions: transplant recipients, HIV infection, haemodialysis, liver cirrhosis, and immunosuppressant therapy. Anti-HEV IgG/IgM (Wantai ELISA) and HEV-RNA by an automated highly sensitive assay (Roche diagnostics) were performed in all subjects. In addition, all participants answered an epidemiological survey. RESULTS: Three hundred and eighty-one patients were included: 131 transplant recipients, 115 cirrhosis, 51 HIV-infected subjects, 87 on immunosuppressants, 4 hemodialysis. Overall, 210 subjects were on immunosuppressants. Anti-HEV IgG was found in 94 (25.6%) subjects with similar rates regardless of the cause for immune impairment. HEV-RNA was positive in 6 (1.6%), all of them transplant recipients, yielding a rate of chronic HEV of 5.8% among solid-organ recipients. In the transplant population, only therapy with mTOR inhibitors was independently associated with risk of chronic HEV, whereas also ALT values impacted in the general model. CONCLUSIONS: Despite previous abnormal transaminases values, chronic HEV was only observed among solid-organ recipients. In this population, the rate of chronic HEV was 5.8% and only therapy with mTOR inhibitors was independently associated with chronic hepatitis E.

Hepatitis aguda per virus de l’hepatitis E / Hepatitis aguda por virus de la hepatitis E / Acute hepatitis by Hepatitis E virus

Introducció. L’hepatitis aguda és un procés necroinflamatoridel fetge causat per una noxa puntual. Analíticament esmanifesta per un augment de les transaminases i la presentació clínica pot ser variable (de formes subclíniques a insuficiència hepàtica aguda). L’estudi d’hepatitis inclouproves per valorar el grau d’alteració fisiològica i per identificar-ne l’etiologia. La causa més freqüent són les infeccions víriques.Cas clínic. Pacient de 8 anys amb família originària delPakistan, d’on retorna poc abans d’iniciar la clínica. Presenta abdominàlgia, diarrea, febre, colúria i acòlia. En l’exploració física destaca icterícia mucocutània, esplenomegàlia i hepatomegàlia lleus. L’analítica presenta augmentde transaminases i bilirubina directa. S’ingressa per a estudi i tractament simptomàtic. En les serologies s’obté unresultat positiu a virus d’hepatitis E.Comentaris. El virus de l’hepatitis E (VHE) és un virus RNAque pertany a la família Herpesviridae. La caracteritzaciómolecular ha permès identificar-ne quatre genotips: HVE1i HVE2 infecten únicament humans i són predominants enpaïsos en vies de desenvolupament. HVE3 i HVE4 infectentambé altres mamífers. Són responsables dels casos esporàdics a escala mundial. La majoria d’infeccions sónasimptomàtiques en pacients immunocompetents, però demés risc en pacients immunodeprimits pel risc més alt de cronificació. (AU)

Introducción. La hepatitis aguda es un proceso necroinflamatoriodel hígado causado por una noxa puntual. Analíticamente se manifiesta por un aumento de las transaminasas y la presentaciónclínica puede ser variable (de formas subclínicas a insuficienciahepática aguda). El estudio de hepatitis incluye pruebas para valorar el grado de alteración fisiológica y para identificar su etiología. La causa más frecuente son las infecciones víricas.Caso clínico. Paciente de 8 años con familia originaria de Pakistán,de donde vuelve poco antes de iniciar la clínica. Presenta abdominalgia, diarrea, fiebre, coluria y acolia. En la exploración físicadestaca ictericia cutánea-mucosa, esplenomegalia y hepatomegalia leves. En la analítica presenta aumento de transaminasas y bilirrubina directa. Se ingresa para estudio y tratamiento sintomático. En las serologías se obtiene un resultado positivo a virus dela hepatitis E.Comentarios. El virus de la hepatitis E (VHE) es un virus RNA quepertenece a la familia Herpesviridae. La caracterización molecularha permitido identificar cuatro genotipos: HVE1 y HVE2 infectanúnicamente a humanos y son predominantes en países en vías dedesarrollo. HVE3 y HVE4 infectan también a otros mamíferos. Sonresponsables de los casos esporádicos a nivel mundial. La mayoríade infecciones son asintomáticas en pacientes inmunocompetentes, pero de mayor riesgo en pacientes inmunodeprimidos por elmayor riesgo de cronificación. (AU)

Introduction. Acute hepatitis is a necroinflammatory process of theliver caused by isolated noxa. Its laboratory findings are characterized by an increase in liver transaminases, and the clinical presentation may be variable (from subclinical forms to acute liverfailure). The study of hepatitis includes tests to assess the degreeof physiological alteration and to identify its etiology. The mostcommon cause is viral infections.Clinical case. An 8-year-old patient who recently returned from atrip to Pakistan presented with abdominal pain, diarrhea, fever,choluria and acholia. Physical examination revealed mild mucocutaneous jaundice, splenomegaly, and hepatomegaly. Laboratoryevaluation showed an increase in liver transaminases and directbilirubin. He was admitted for diagnostic evaluation and symptomatic treatment. Serology for hepatitis E virus resulted positive.Comments. Hepatitis E virus (HEV) is an RNA virus of the Herpesviridae family. Molecular characterization has identified four genotypes, HVE 1-4. HVE1 and HVE2 infect only humans and are predominant in developing countries, whereas HVE3 and HVE4 alsoinfect other mammals. HVE is responsible for sporadic casesworldwide. Most infections are asymptomatic in immunocompetent patients but risk is higher in immunocompromised patientsdue to increased risk of chronicity. (AU)

Virus de la hepatitis E

Resumen El virus de la hepatitis E (VHE) es uno de los principales agentes etiológicos de hepatitis entérica en el mundo. En países en vía de desarrollo, la seroprevalencia oscila entre 20 y 50% y en países desarrollados entre 4,4 y 21%. Clínicamente los casos de infección por VHE en individuos inmunocompetentes cursan como una hepatitis viral aguda auto limitada; por el contrario, en mujeres embarazadas, individuos receptores de trasplantes de órganos e individuos que conviven con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), la infección puede manifestarse como una hepatitis crónica y grave. En América Latina, sólo Brasil y Argentina reportan cifras en individuos que conviven con el VIH. Se requieren más estudios en nuestra región que permitan determinar la prevalencia del VHE en individuos inmunosuprimidos, donantes de sangre y población general para adoptar medidas que garanticen un diagnóstico oportuno, acceso a la atención y el control de la transmisión.

Abstract The hepatitis E virus (HEV) is one of the main etiological agents of enteric hepatitis in the world. In developing countries its sero-prevalence ranges from 20 to 50% and in developed countries from 4.4% to 21%. Clinically, cases of HEV infection in immunocompetent individuals present as self-limited acute viral hepatitis; conversely, in pregnant women, transplanted individuals, and individuals living with the human immunodeficiency virus (HIV), the infection can manifest as chronic and severe hepatitis. In Latin America, only Brazil and Argentina report figures for individuals living with HIV. More studies are required in our region to determine the prevalence of HEV in immunosuppressed individuals, blood donors, and the general population to adopt measures that guarantee timely diagnosis, access to care, and control of transmission.

Prevalencia de anticuerpos anti-hepatitis E de tipo IgG evaluados a través de tres ensayos comerciales / Prevalence of anti-Hepatitis E IgG analyzed in sera through three commercial kits

Resumen Introducción: El virus de la Hepatitis E (HVE) es de ácido ribonucleico desnudo, los genotipos 3 y 4 pueden presentarse como una zoonosis transmitida por agua o alimentos contaminados. En la zona del eje cafetero-Colombia, no se ha descrito la presencia de anticuerpos para este virus en la comunidad. Objetivo: Determinar la prevalencia de anticuerpos anti-HVE de tipo Inmuniglobulinas G (IgG) en muestras de suero de un laboratorio clínico del Eje Cafetero. Materiales y métodos: En un periodo de dos meses se analizaron 90 sueros de pacientes atendidos en un laboratorio clínico de la ciudad de Armenia, se utilizaron tres técnicas diferentes para la caracterización de los anticuerpos y se compararon sus resultados. Resultados: De los 90 sueros evaluados, la técnica de ELISA de anticuerpos totales ELISA IgG anti HVE Recom Well marca Mikrogen identificó 2 sueros positivos (2,2%), la Prueba ELISA IgG HVE versión ULTRA® marca Diapro evidenció una muestra equivoca (1,1%). La prueba western blot Recom line HVE marca Mikrogen detectó 4 muestras positivas (4,4%). Conclusiones: Se encontró una prevalencia de anticuerpos HVE IgG que oscila entre 0 y 4,4% dependiendo de la prueba comercial utilizada, evidenciando circulación del virus y un posible ciclo infecciosos en la región.

Abstract Introduction: Hepatitis E virus (HEV) is a nonenveloped, RNA virus. HEV genotypes 3 and 4 are considered zoonosis transmitted by contaminated water and/or food. The presence of antibodies against this virus have not been described in communities inhabiting the "Coffee Axis" region of Colombia. Objective: To determine the prevalence of anti-Hepatitis E IgG in serum samples analyzed in a clinical laboratory from the Colombian Coffee Axis. Materials and methods: 90 serum samples from patients treated at a clinical laboratory in the city of Armenia (Quindio) were analyzed and compared through three different methods that characterize antibodies. Results: The Mikrogen recomWell ELISA kit (IgG anti-HEV) identified two positive sera (2.2%). The Diapro HEV IgG ELISA (version ULTRA®) test registered a false positive sample (1.1%). The Mikrogen recom Line HVE western blot assay detected 4 positive samples (4.4%). Conclusions: Depending on the commercial kit used, the prevalence of anti-HEV IgG antibodies fluctuated between 0% to 4.4%, which demonstrates that the virus is circulating and that a possible infectious cycle in this region exists.

Infección por el virus de la hepatitis E: clínica y epidemiología / Clinical and Epidemiology of Hepatitis E Virus Infection

Resumen El virus de la hepatitis E es un patógeno hepatotrópico que se transmite por el agua y alimentos contaminados, y uno de los principales agentes etiológicos de hepatitis viral aguda de transmisión enteral en el mundo. La infección por el virus de la hepatitis E usualmente es autolimitada; sin embargo, se han descrito casos de infección crónica en pacientes inmunocomprometidos. La infección autolimitada no requiere tratamiento; por el contrario, la infección crónica debe tratarse debido al riesgo de progresión a cirrosis o a alguna de las manifestaciones extrahepáticas reportadas. En Colombia, la infección por el virus de la hepatitis E no hace parte del diagnóstico rutinario de hepatitis virales, a pesar de que existe evidencia de la circulación del virus en el país. El presente artículo de revisión tiene como objetivo describir las generalidades del virus de la hepatitis E, así como la historia natural de la infección y los estudios realizados en Colombia que evidencian su presencia en el país. La revisión se realizó mediante una búsqueda de literatura en la base de datos PubMed, SciELO y ScienceDirect, de trabajos originales y revisiones de tema publicados entre el período 1983-2017.

Abstract The hepatitis E virus, a hepatotropic pathogen transmitted by water and contaminated food, is one of the main etiological agents on the planet of enteral transmission of acute viral hepatitis. Hepatitis E infections are usually self-limiting, but cases of chronic infection have been described in immunocompromised patients. While self-limiting infections do not require treatment, chronic infections should be treated because of risk of progression to cirrhosis and/or extra-hepatic manifestations. In Colombia, hepatitis E infections are not included in the routine diagnosis of viral hepatitis, despite evidence of its presence in the country. The objective of this review is to provide a general description of the hepatitis E virus and the natural history of infections and to highlight studies carried out in Colombia showing its presence in the country. The review was carried out through a search in the PUBMED, SCIELO and ScienceDirect databases for of original papers and subject reviews published between 1983 and 2017.

Challenges in research and management of hepatitis E virus infection in Cuba, Mexico, and Uruguay / Retos en la investigación y el tratamiento de la infección por el virus de la hepatitis E en Cuba, México y Uruguay / Desafios em pesquisa e tratamento da infecção pelo vírus da hepatite E em Cuba, ­México e ­Uruguai

ABSTRACT The symposium "Epidemiology of Hepatitis E virus (HEV) Infection and Associated Immune Response" was held at the Universidad de Guadalajara, Mexico, on 14 June 2017, to define the status of research on HEV infection in three countries in Latin America and the Caribbean (LAC)—Cuba, Mexico, and Uruguay—compared to the situation in Germany. Scientists identified specific research gaps in understanding HEV transmission and the resulting impact on development of disease in the three abovementioned LAC countries. Specific recommendations for implementing standardized serologic and molecular diagnostic methods and epidemiologic, basic, and applied research aimed to develop prevention and handling strategies for this infection, along with the associated comorbidities in the three LAC countries, were also discussed. Given similar demographic, sanitary, and economic conditions in other LAC countries that could predispose them to be at high risk for HEV transmission and infection, these research gaps and recommendations might apply to the entire LAC region. This report was ­prepared by meeting participants based on 1) symposium presentations, 2) literature reviews, and 3) group discussions.

RESUMEN El 14 de junio del 2017 se realizó en la Universidad de Guadalajara (México) un simposio sobre las características epidemiológicas de la infección por el virus de la hepatitis E (VHE) y la respuesta inmunitaria asociada. El objetivo fue definir el estado de las investigaciones sobre la infección por el VHE en tres países de América Latina y el Caribe —Cuba, México y Uruguay— en comparación con la situación en Alemania. Los científicos señalaron que para comprender la transmisión del VHE y la consiguiente repercusión en el avance de la infección en estos tres países latinoamericanos aún faltan investigaciones sobre ciertos temas específicos. También analizaron recomendaciones concretas para poner en práctica métodos estandarizados de diagnóstico serológico y molecular, y realizar investigaciones epidemiológicas, básicas y aplicadas a fin de elaborar estrategias de prevención y tratamiento de esta infección y las comorbilidades asociadas en los tres países antes mencionados. Considerando que otros países de América Latina y el Caribe presentan condiciones demográficas, sanitarias y económicas similares que podrían implicar una predisposición a un riesgo alto de transmisión del VHE y de infección por este virus, este análisis sobre las brechas y recomendaciones en el ámbito de la investigación podría aplicarse en toda la subregión. El presente informe fue elaborado por los participantes del simposio sobre la base de: 1) presentaciones del simposio; 2) revisiones bibliográficas; y 3) debates en grupos.

RESUMO O simpósio Epidemiologia da infecção pelo vírus da hepatite E (HEV) e ­resposta imune associada foi realizado na Universidade de Guadalajara, no México, em 14 de junho de 2017, para determinar a situação da pesquisa em HEV em três países da América Latina e Caribe (ALC) - Cuba, México e Uruguai - em comparação à Alemanha. Os especialistas identificaram lacunas específicas nas pesquisas no que se refere ao entendimento da transmissão do HEV e ao impacto resultante do surgimento da doença nos três países da ALC mencionados. Também foram debatidas recomendações aos três países da ALC, especificamente implementar métodos sorológicos e moleculares padronizados de diagnóstico e realizar pesquisa epidemiológica, básica e aplicada visando elaborar estratégias de prevenção e de enfrentamento da infecção e das comorbidades associadas. Diante da semelhança das condições demográficas, econômicas e de saúde que poderia predispor outros países da ALC a um maior risco de transmissão e infecção de HEV, as lacunas em pesquisa e recomendações provavelmente se aplicam à toda a Região da ALC. Este relatório foi preparado pelos participantes do encontro embasado nas apresentações do simpósio, revisão da literatura científica e discussões em grupo.

Frecuencia de anticuerpos contra el virus de la hepatitis E en donantes de sangre del municipio de Yarumal, Antioquia / Frequency of Antibodies to Hepatitis E In Blood Donors in the Municipality of Yarumal, Antioquia

Introducción: el virus de la Hepatitis E (VHE), transmitido por la ruta fecal-oral, causa enfermedad hepática aguda. En Colombia se han realizado algunos estudios en pacientes con diagnóstico de hepatitis viral, en trabajadores de fincas porcícolas, en población porcina y en muestras ambientales. Objetivo: evaluar la presencia de anticuerpos anti-VHE en muestras de donantes de sangre del municipio de Yarumal, departamento de Antioquia. Metodología: se obtuvieron muestras de suero de donantes de sangre colectadas por la Cruz Roja Colombiana en una campaña de donación voluntaria en el municipio de Yarumal. En las muestras se determinó la presencia de anticuerpos anti-VHE tipo IgM e IgG mediante estuche comercial de ELISA. Resultados: se analizaron 42 muestras de suero, 19 de las cuales (45,2%) fueron positivas para anticuerpos anti-VHE IgG. Ninguna de las muestras fue positiva para anticuerpos anti-VHE tipo IgM. Conclusiones: este es el primer reporte de anticuerpos anti-VHE en donantes de sangre en Colombia. La frecuencia de anti-VHE (45,2%) es mayor a lo reportado previamente en otros estudios realizados en el país y a lo reportado en donantes de sangre en otros países de América Latina. Esta frecuencia podría estar relacionada con el contacto con cerdos infectados, así como con la exposición a agua contaminada con el virus. Sin embargo, estudios adicionales deben ser realizados en otras poblaciones similares en el país para confirmar este hallazgo.

Introduction: The hepatitis E virus (HEV) is transmitted via the fecal-oral route and causes acute liver disease. In Colombia there have been some studies of patients who have been diagnosed with viral hepatitis, of swine farm workers and in environmental samples. Objective: The objective of this study was evaluate samples from blood donors in the municipality of Yarumal in the department of Antioquia for the presence of anti-HEV antibodies. Methods: Serum samples were obtained from blood donated to the Colombian Red Cross by blood donors on a voluntary basis in a campaign in the municipality of Yarumal. Samples in the presence of anti-HEV IgM and IgG ELISA using commercial kit was determined.Results: Forty-two serum samples were analyzed: 19 (45.2%) were positive for anti-HEV IgG. None of the samples were positive for anti-HEV IgM. Conclusions: This is the first report of anti-HEV antibodies in blood donors in Colombia. The frequency of anti-HEV (45.2%) is higher than previously reported in other studies in this country and in blood donors in other Latin American countries. This frequency may be linked to contact with infected pigs and to exposure to water contaminated with the virus. However, additional studies should be conducted in similar populations in the country to confirm this finding

Infección simultánea por el virus de la hepatitis E y de otras hepatitis virales en Colombia y su caracterización genotípica / Coinfection of hepatitis E virus and other hepatitis virus in Colombia and its genotypic characterization

Introducción. El virus de la hepatitis E se ha convertido en un problema de salud pública, especialmente en los países en desarrollo. Se conocen cuatro genotipos en mamíferos, de los cuales el G3 se ha encontrado en hepatitis autóctonas en países y regiones con gran población de cerdos, y el G1 se ha asociado a muertes maternas. Objetivo. Determinar la infección simultánea con el virus de la hepatitis E y sus genotipos circulantes en Colombia en 1.097 sueros utilizando los marcadores serológicos de los virus de las hepatitis A, B y C. Materiales y métodos. Se seleccionaron 1.097 sueros provenientes de diferentes municipios de Colombia, conservados en el Laboratorio de Virología del Instituto Nacional de Salud. Se determinaron los anticuerpos IgG e IgM anti-hepatitis E. A los positivos se les amplificó el genoma viral mediante reacción en cadena de la polimerasa convencional. Los productos se secuenciaron y analizaron filogenéticamente y se los comparó con las secuencias del ORF2 registradas en el GenBank. Resultados. Se identificaron 278 sueros positivos para IgG anti-hepatitis E, 62 para IgM y 64 para ambos marcadores. La infección simultánea con los virus de la hepatitis E y la hepatitis A determinada por IgG anti-hepatitis E fue de 33,6 % y por IgM anti-hepatitis E fue de 16,1 %; la infección simultánea por los virus de la hepatitis E y B fue de 23,4 % y 8,1 %, y por los virus de la hepatitis E y C fue de 35,4 % y 5,83 %, respectivamente. De las 52 muestras positivas en la reacción en cadena de la polimerasa convencional, nueve secuencias se agruparon como genotipo 3a de origen porcino, cepa norteamericana. Conclusiones. La mayor seropositividad se registró para las hepatitis A y E. La frecuencia de la infección simultánea con el virus de la hepatitis E y otros virus hepatótropos indica que este patógeno puede ser más frecuente de lo esperado. La circulación del genotipo 3a implica que esta enfermedad puede presentarse en forma de brote y de zoonosis en Colombia.

Introduction: Hepatitis E virus has emerged as a public health problem, particularly in developing countries. The four genotypes identified in mammals include the G3 found in indigenous hepatitis in countries and regions with high porcine population, and the G1, associated with maternal deaths. Objective: To determine coinfection by hepatitis E virus and the circulating genotypes in Colombia in 1,097 samples using serological markers for hepatitis A, B and C. Materials and methods: Serum samples of 1,097 patients from different regions of Colombia stored at the Laboratorio de Virología of the Instituto Nacional de Salud were selected to detect IgG and IgM anti-hepatitis E virus antibodies. The viral genomes of positive samples were amplified by RT-PCR, and the products were sequenced and phylogenetically analyzed by comparing ORF2 sequences deposited in the GenBank. Results: IgG anti-hepatitis E virus antibodies were found in 278 samples, IgM in 62, and both markers in 64. Hepatitis E virus and hepatitis A virus coinfection determined by IgG anti-hepatitis E virus was 33.6% and 16.1% by IgM; hepatitis E virus and hepatitis B virus coinfection was 23.4% and 8.1%, and hepatitis E virus and hepatitis C virus coinfection was 35.4% and 5.83%, respectively. Among the 52 positive samples by PCR nine were sequenced and grouped within genotype 3A of the American porcine strain. Conclusions: The highest seropositivity was observed for hepatitis A and E. The incidence of hepatitis E virus coinfection with other hepatotropic viruses indicated that this pathogen is more frequent than expected. The circulation of genotype 3A implies that this disease may occur in outbreaks and as zoonosis in Colombia.

[Epidemiology of hepatitis E virus infection in Spain]. / Epidemiología de la infección por el virus de la hepatitis E en España.

The general features of the epidemiology and ecology of hepatitis E virus in Spain are already known after 20 years of investigations. Genotype 3 strains, mainly from sub-genotype 3f, circulated among swine livestock and certain wild mammals, and would be sporadically transmitted to humans through direct contact with the reservoirs or by consumption of foods derived from them. Bivalve shellfish contaminated by hepatitis E virus from sewage could also play a role in transmission. Although the interpretation of results from seroprevalence studies in low endemic settings is still controversial, antibody to hepatitis E virus displays an overall prevalence less than 10% among the population of Spain, increasing significantly with age. From the, approximately, 150 cases of acute hepatitis E recorded in the international literature, males older than 40 years, suffering a mild, locally acquired disease predominate. In addition, hepatitis E might be more frequent in the North of the country than in other regions. Although the disease does not usually have a great clinical relevance, the occasional finding of cases of fulminant hepatitis, and of ribavirin-resistant, chronic hepatitis E virus infections among the immunocompromised would recommend the surveillance of the infection by the public health authority and a better implementation of specific diagnostic procedures in clinical laboratories.

High prevalence of antibodies against hepatitis E virus in HIV-infected patients with unexplained liver disease.

OBJECTIVE: To look for evidence of hepatitis E virus (HEV) exposure in HIV-infected patients with unexplained elevations of liver stiffness (LS). METHODS: Case-control study conducted in 31 HIV-infected patients with unexplained elevations of LS and in 31 HIV-controls with normal LS, matched by age, sex and CD4 cell-counts. Serum HEV antibodies were tested by two ELISA procedures and by Immunoblot. We defined exposure to HEV as the detection of serum HEV antibodies by at least one of the two ELISA assays, provided that it was confirmed by Immunoblot. A real-time PCR RNA assay was conducted in all plasma samples to identify subjects with active HEV infection. RESULTS: Exposure to HEV was demonstrated, according to the criteria used in this study, in 9 (29%) of the cases, whereas it was shown in 5 (16%) of the controls (p=.3). Serum HEV RNA was detected in none of the controls and in only in one case. This patient had a documented chronic hepatitis E with progression to cirrhosis. CONCLUSIONS: HEV antibodies are frequently found in HIV-infected patients with unexplained liver disease.

Detección del gnnoma del virus de la hepatitis (vhe) en muestras de heces de cerdos en plantas de beneficio de antioquia, Colombia / Detection o hepaatitis e vius (hev) genome from pigs feces samples in slauughterhouses in antioquia, Colombia

El Virus de la Hepatitis E (VHE) es uno de los agentes causales de enfermedad hepática aguda en humanos, aunque también puede inducir hepatitis crónica en pacientes inmunocomprometidos. Existen cuatro genotipos que generan enfermedad en humanos: los genotipos 1 y 2 asociados con brotes epidémicos por consumo de aguas contaminadas y los genotipos 3 y 4 de trasmisión zoonótica, implicados en brotes esporádicos en países desarrollados donde el cerdo es el principal reservorio. En Colombia existe evidencia serológica de la infección en humanos y cerdos: se ha detectado el genoma viral en hígados de cerdos en plantas de beneficio y expendios de carne; sin embargo no se conoce lo suficiente sobre la infección en el país. Con el fin de determinar si los cerdos del departamento de Antioquia (Colombia) están excretando VHE en la edad del beneficio, se obtuvieron 152 muestras de heces de cerdos en cinco plantas de beneficio de distintas regiones del departamento en las que se determinó la presencia del genoma viral por medio RT-PCR. El porcentaje de positividad hallado fue del 26.9% (41/152); se encontró, además, que los cerdos que provenían de las subregiones Norte y Oriente de Antioquia tuvieron el menor (11.6%) y mayor (58.3%) porcentaje de muestras positivas, respectivamente. Estos resultados indican que los cerdos en el momento de sacrificio están excretando el virus a través de sus heces y que el VHE está circulando en las diferentes subregiones del departamento.

The Hepatitis E Virus (HEV) is one of the causative agents of acute liver disease in humans, although it can also lead to chronic hepatitis in immunocompromised patients. There are four genotypes that generate human disease: genotypes 1 and 2, associated with outbreaks due to consumption of contaminated waters, and genotypes 3 and 4 by zoonotic transmission, implicated in sporadic outbreaks in developed countries, where pigs are the main reservoir. In Colombia there is serological evidence of infection in humans and pigs: the viral genome has been detected in livers of pigs at slaughterhouses and butcher shops; however is not enough known about the infection in the country. In order to find out whether pigs in Antioquia (Colombia) are excreting the virus, the presence of the viral genome by RT-PCR was determined in 152 samples of pig feces obtained at five slaughterhouses of Antioquia, which came from different regions of the department. The percentage of positivity was 26.9% (41/152) and pigs that came from the North and East subregions of Antioquia had the lowest (11.6%) and higher (58.3%) percentage of positive samples, respectively. These results indicate that pigs at slaughter age are excreting the virus in their feces and that HEV is circulating in different subregions of the department.

Primer caso de falla hepática aguda por virus de la Hepatitis E en Uruguay / First case of Hepatitis E Virus- induced acute liver failure in Uruguay

Resumen: La infección por el Virus de la Hepatitis E (VHE) en individuos inmunocompetentes generalmente se presenta como hepatitis aguda autolimitada. En determinados escenarios clínicos (embarazadas y pacientes con enfermedad hepática crónica) puede manifestarse como falla hepática aguda. Se han descripto casos de hepatitis crónica en inmunocomprometidos. En Uruguay se han reportado 14 casos de hepatitis aguda autolimitada por VHE. En el presente artículo se describe el primer caso de falla hepática aguda por VHE en Uruguay.

Abstract: Hepatitis E Virus (HEV) typically causes an acute and self-limiting infection in immune-competent individuals, though acute liver failure is described in some settings (pregnancy, chronic liver disease). Chronic hepatitis has been described in immunosuppressed patients. Fourteen autochthonous cases of self-limiting acute hepatitis for HEV were reported in Uruguay. The first case of acute liver failure for HEV is described in the present article.

Virus de la hepatitis E: Características biológicas y epidemiológicas / Hepatitis E virus: Biological and epidemiological characteristics

El virus de la hepatitis E (VHE) es un virus ARN de transmisión entérica, asociado a zoonosis y a una alta tasa de hepatitis fulminante en mujeres embarazadas. En este trabajo se describen las principales características moleculares y epidemiológicas del VHE. Ha sido clasificado recientemente como el único miembro del género Hepevirus de la nueva familia Hepeviridae. Actualmente, todas las cepas que infectan al hombre se agrupan en 4 de los 5 genotipos identificados para el VHE. Se ha descrito una alta tasa de infección por VHE entre adultos jóvenes y en edad productiva. En el curso de la infección, los anticuerpos IgM anti-VHE evidencian infección aguda, mientras que los anticuerpos IgG anti-VHE constituyen el marcador epidemiológico de infección pasada por el virus. A pesar de su amplia distribución mundial y su predominio en países en desarrollo, el VHE ha sido uno de los virus de hepatitis menos estudiados a nivel global. Se desconoce el verdadero impacto de esta infección en Latinoamérica dada la escasez de estuches de inmunodiagnóstico comercialmente disponibles para su detección, limitando el uso de estas metodologías a investigaciones epidemiológicas aisladas. Se requieren estudios futuros para optimizar los inmunoensayos serológicos existentes, facilitando su incorporación a la rutina del laboratorio clínico.

Hepatitis E virus (HEV) is an RNA virus enterically-transmitted, associated to zoonosis, and a high rate of fulminating hepatitis en pregnant women. This paper describes the main molecular and epidemiological characteristics of HEV. It has been recently classified as the only member of the Hepevirus genus of the new Hepeviridae family. At present, all strains which infect humans are grouped in 4 of the 5 genotypes identified for HEV. A high rate of HEV infection has been described among young adults in productive ages. During the course of the infection anti-HEV IgM antibodies signify an acute infection, while anti-HEV IgG antibodies constitute an epidemiological marker of the virus transmitted infection. In spite of its worldwide distribution and its predominance in developing countries, HEV has been one of the least studies hepatitis viruses at a global level. The true impact of this disease in Latin America is unknown due to the scarcity of immunodiagnostic diagnostic kits commercially available for its detection, limiting the use of these methodologies to isolated epidemiological investigations. Future studies are required for optimizing the existing serologic immunoassays, facilitating their incorporation to routine clinical laboratory tests.

Aislamiento y propagación del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares / Isolation and propagation of hepatitis E virus in several cell lines

Antecedentes: el virus de la hepatitis E es el agente causal de la hepatitis E. Las propiedades biológicas y moleculares de las cepas asiáticas del VHE ya han sido exploradas en cultivos celulares. Objetivos: aislar y propagar una cepa cubana del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares. Métodos: la monocapa de las células A549 fue inoculada con una suspensión de heces obtenida de un paciente con diagnóstico serológico y molecular de hepatitis E. Estas células fueron observadas hasta el décimo pase. Mientras que, las líneas celulares MRC5, LLCMK2, HEP-2, FRhK4 y HeLa fueron utilizadas para propagar el virus de la hepatitis E, a partir del sobrenadante obtenido del tercer pase en A549. Estas células fueron seguidas hasta el tercer pase. El ARN y los antígenos de la cepa ECV/2349-03 fueron identificados por TR-RCP e inmunofluorescencia indirecta. Resultados: en las células A549 el ECP apareció desde el primer pase, a los 3 d de posinoculación. El genoma y los antígenos del virus fueron identificados en todos los pases seriados. En el resto de las líneas celulares estudiadas no se observó el ECP. En estas células el material genético del virus de la hepatitis E se detectó desde el primer pase y los antígenos a partir del segundo pase, excepto en las HeLa. Conclusiones: estos resultados confirman que las células A549 pueden ser utilizadas para aislar y propagar el virus de la hepatitis E, mientras que las células MRC5, LLCMK2, HEP-2 y FRhK4 son capaces de mantener el crecimiento viral.

Background: hepatitis E virus (HEV) is the causative agent of hepatitis E. Biological and molecular properties of Asian HEV strains have been explored in cells cultures. Objetives: the aim of this investigation was to isolate and propagate a Cuban HEV isolate in different cell lines. Methods: A549 cells monolayer was infected with faeces suspension from patient with sporadic hepatitis E and followed up until tenth passage. Lately, the supernatant harvested from third passage in A549 cells was inoculated in MRC5, HEP-2, LLCMK2, HeLa y FRhK4 for propagation study. These cells were observed up to third passage. RNA and viral antigen of ECV/2349-03 HEV strain were identified by RT-PCR and indirect immunofluorescence. Results: CPE appeared since first passage, at third day of post-inoculation in A549 cells. HEV antigens and genome were detected in all serial passages. CPE was not observed in the rest of cellular cultures. In the cells used for propagation the viral genome was observed from first passage, while the antigens were detected since second passage, except HeLa. Conclusions: these results confirm that A549 can be used to isolate and propagate HEV. Meanwhile, the MRC5, HEP-2, LLCMK2 and FRhK4 were able to support viral growing.

Aislamiento y propagación del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares / Isolation and propagation of hepatitis E virus in several cell lines

Antecedentes: el virus de la hepatitis E es el agente causal de la hepatitis E. Las propiedades biológicas y moleculares de las cepas asiáticas del VHE ya han sido exploradas en cultivos celulares. Objetivos: aislar y propagar una cepa cubana del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares. Métodos: la monocapa de las células A549 fue inoculada con una suspensión de heces obtenida de un paciente con diagnóstico serológico y molecular de hepatitis E. Estas células fueron observadas hasta el décimo pase. Mientras que, las líneas celulares MRC5, LLCMK2, HEP-2, FRhK4 y HeLa fueron utilizadas para propagar el virus de la hepatitis E, a partir del sobrenadante obtenido del tercer pase en A549. Estas células fueron seguidas hasta el tercer pase. El ARN y los antígenos de la cepa ECV/2349-03 fueron identificados por TR-RCP e inmunofluorescencia indirecta. Resultados: en las células A549 el ECP apareció desde el primer pase, a los 3 d de posinoculación. El genoma y los antígenos del virus fueron identificados en todos los pases seriados. En el resto de las líneas celulares estudiadas no se observó el ECP. En estas células el material genético del virus de la hepatitis E se detectó desde el primer pase y los antígenos a partir del segundo pase, excepto en las HeLa. Conclusiones: estos resultados confirman que las células A549 pueden ser utilizadas para aislar y propagar el virus de la hepatitis E, mientras que las células MRC5, LLCMK2, HEP-2 y FRhK4 son capaces de mantener el crecimiento viral(AU)

Background: hepatitis E virus (HEV) is the causative agent of hepatitis E. Biological and molecular properties of Asian HEV strains have been explored in cells cultures. Objetives: the aim of this investigation was to isolate and propagate a Cuban HEV isolate in different cell lines. Methods: A549 cells monolayer was infected with faeces suspension from patient with sporadic hepatitis E and followed up until tenth passage. Lately, the supernatant harvested from third passage in A549 cells was inoculated in MRC5, HEP-2, LLCMK2, HeLa y FRhK4 for propagation study. These cells were observed up to third passage. RNA and viral antigen of ECV/2349-03 HEV strain were identified by RT-PCR and indirect immunofluorescence. Results: CPE appeared since first passage, at third day of post-inoculation in A549 cells. HEV antigens and genome were detected in all serial passages. CPE was not observed in the rest of cellular cultures. In the cells used for propagation the viral genome was observed from first passage, while the antigens were detected since second passage, except HeLa. Conclusions: these results confirm that A549 can be used to isolate and propagate HEV. Meanwhile, the MRC5, HEP-2, LLCMK2 and FRhK4 were able to support viral growing(AU)